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試劑(ji)盒(he)組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液(ye) | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑(ji) | 6ml×1瓶(ping) | 8 | 標(biao)準品(8000 nmol/L) | 0.5ml×1瓶(ping) |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標(biao)準品稀釋(shi)液 | 1.5ml×1瓶(ping) |
4 | 樣品稀(xi)釋液 | 6ml×1瓶(ping) | 10 | 說明書 | 1份(fen) |
5 | 顯色(se)劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張(zhang) |
6 | 顯(xian)色劑(ji)B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封(feng)袋(dai) | 1個 |
ELISA測定中影(ying)響因素較多(duo),而且其操(cao)作(zuo)中有一定的技術要求,在(zai)臨(lin)床檢驗中除正常反應外(wai),有時常可(ke)見到(dao)一些(xie)錯誤結果(即假(jia)陽(yang)性或假(jia)陰性)如標(biao)本的影(ying)響,對這(zhe)一方面(mian)上(shang)海恒遠(yuan)生物來為(wei)大家細(xi)細(xi)解讀:
1. 溶血標(biao)本及混(hun)有紅細胞的(de)血清采(cai)用ELISA法檢測易產生(sheng)假(jia)陽性(xing)。可(ke)能是溶(rong)血(xue)血(xue)清(qing)中(zhong)含(han)有過(guo)氧化酶(mei)物(wu)質(zhi)(紅細胞或(huo)血(xue)紅蛋白中(zhong)的亞鐵血(xue)紅素),在洗滌過(guo)程中(zhong)往往難(nan)以完全洗脫,它可(ke)使H2O2釋放出原生態氧(O),從而(er)催化底物(wu)四甲(jia)基聯苯胺生成可溶性的有色物(wu)質,即顯藍色,產生假陽性。所以嚴重溶血(xue)標(biao)本禁用。
2. 標(biao)(biao)本(ben)受細菌污染(ran)。因(yin)菌體中可(ke)(ke)能(neng)含有內源性辣(la)根過氧(yang)化物酶,因(yin)此,被細菌污染(ran)的標(biao)(biao)本(ben)同溶血標(biao)(biao)本(ben)一樣,亦可(ke)(ke)產(chan)生非(fei)特異性顯色(se)而干擾測定結果。
3. 標本(ben)保(bao)存(cun)不(bu)當(dang)。在(zai)冰箱中(zhong)保(bao)存(cun)過久的標本(ben),在(zai)間接法ELISA測定中會導致本底過深(shen)、造成假陽性;為克服上(shang)述干擾,ELISA試劑(ji)盒(he)測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立(li)即測定,5 d內(nei)測定的血清標本(ben)可存放于4℃,1周后測定(ding)的(de)血清標本應低溫凍存;凍存后融(rong)解(jie)的(de)標本,蛋白質局部濃縮(suo),分布不均,應充分混(hun)合(he)后再測定(ding),但混(hun)勻時應輕柔,不可強(qiang)烈振蕩。
“組蛋白H2b裸鼠ELISA試劑盒”優勢介紹:
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試劑(ji)的(de)準備(bei)
1. 標(biao)準品:標(biao)準品的系(xi)列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標(biao)準品振蕩混(hun)勻(yun)。稀釋比例按(an)下表中進行:
400 pg/ml | (6號標(biao)準品) | 原倍(bei)濃度不用稀釋(shi)直(zhi)接加入50ul |
200 pg/ml | (5號(hao)標準品(pin)) | 100ul的原(yuan)倍(bei)標準(zhun)品加入100ul的標準(zhun)品稀釋液(ye) |
100 pg/ml | (4號標(biao)準品) | 100ul的5號標準品加入(ru)100ul的標準品(pin)稀釋液 |
50 pg/ml | (3號標(biao)準品) | 100ul的4號標(biao)準品(pin)加入100ul的(de)標準品稀釋液 |
25 pg/ml | (2號標準品) | 100ul的3號(hao)標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
12.5 pg/ml | (1號標準品(pin)) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準(zhun)品稀釋液(ye) |
0 pg/ml | (空白對照) | 原倍濃度不用稀(xi)釋直接加(jia)入50ul |
2. 洗(xi)滌緩沖液(ye)(50×)的稀釋:蒸餾(liu)水(shui)50倍稀釋(shi)。
ELISA浸泡式洗(xi)滌:
1. 吸(xi)干或甩干孔內(nei)反(fan)應(ying)液;
2. 用洗滌液過(guo)洗一遍(將洗(xi)滌(di)液注(zhu)滿板孔后,即(ji)甩去(qu));
3. 浸泡,即將洗(xi)滌液(ye)注滿板孔,放置1-2分鐘,間(jian)歇搖動,浸泡時間(jian)不可隨(sui)意縮短;
4. 吸干孔(kong)內液(ye)體。吸干應(ying)徹底,可用水(shui)泵(beng)或真空(kong)泵(beng)抽吸,也可甩去液(ye)體后在(zai)清潔毛巾或吸水(shui)紙上拍(pai)干;
5. 重復操(cao)作c和d,洗滌3-4次(或(huo)按說明規定)。在(zai)間(jian)接法中如(ru)本底較高,可增加洗滌次數或延長(chang)浸泡(pao)時間(jian)。
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更新時間:2023/11/8 8:57:35
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