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試劑的準備(bei)
1.標(biao)準品:標(biao)準品的(de)系列稀釋應在實驗時準備,不能儲(chu)存(cun)。稀釋前將標(biao)準品振(zhen)蕩混勻。稀釋比例(li)按下表中進行:
400 pg/ml | (6號(hao)標準(zhun)品) | 原倍濃度(du)不用稀釋(shi)直接加(jia)入50ul |
200 pg/ml | (5號標準品) | 100ul的(de)原倍標準品(pin)加入(ru)100ul的(de)標準品稀釋(shi)液(ye) |
100 pg/ml | (4號標準品) | 100ul的5號(hao)標準品加(jia)入100ul的標準品稀釋液 |
50 pg/ml | (3號標準(zhun)品) | 100ul的4號標準(zhun)品加入(ru)100ul的標(biao)準(zhun)品稀釋(shi)液 |
25 pg/ml | (2號標準(zhun)品) | 100ul的3號標準品(pin)加入100ul的標準品稀釋液 |
12.5 pg/ml | (1號(hao)標準品) | 100ul的2號(hao)標(biao)準品(pin)加入100ul的標準(zhun)品稀釋(shi)液(ye) |
0 pg/ml | (空白對照) | 原倍濃(nong)度不用稀釋直接(jie)加入(ru)50ul |
2.洗滌(di)緩沖(chong)液(ye)(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
ELISA浸泡(pao)式(shi)洗滌:
1. 吸干或(huo)甩干孔(kong)內反應(ying)液;
2. 用(yong)洗(xi)(xi)滌液過(guo)洗(xi)(xi)一遍(將(jiang)洗(xi)滌液(ye)注滿(man)板孔后,即(ji)甩去);
3. 浸泡,即(ji)將(jiang)洗滌液注(zhu)滿板(ban)孔,放置1-2分鐘,間歇搖(yao)動,浸泡(pao)時間不可隨意縮(suo)短;
4. 吸(xi)(xi)干(gan)孔(kong)內液體(ti)。吸(xi)(xi)干(gan)應徹底,可用(yong)水泵或真(zhen)空泵抽吸(xi)(xi),也可甩去(qu)液體(ti)后(hou)在清潔毛巾或吸(xi)(xi)水紙上拍干(gan);
5. 重(zhong)復操作c和d,洗(xi)滌3-4次(或按說明規定(ding))。在間接法中如本(ben)底較高,可增加(jia)洗滌次數或延(yan)長浸泡時間。
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更新時間:2023/11/8 9:21:30
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