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試劑(ji)盒組成
1 | 30倍濃(nong)縮洗滌(di)液(ye) | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液(ye) | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biao)準品(8000 nmol/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀(xi)釋(shi)液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀(xi)釋(shi)液 | 6ml×1瓶(ping) | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯(xian)色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張(zhang) |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封(feng)袋(dai) | 1個 |
ELISA測(ce)定(ding)中影(ying)響(xiang)因(yin)素(su)較多,而且其操作中有一定(ding)的(de)技術(shu)要(yao)求,在臨床檢驗中除正(zheng)常(chang)反應外,有時常(chang)可見到一些錯誤結果(guo)(即假(jia)陽性或假(jia)陰性)如標(biao)本(ben)的(de)影(ying)響(xiang),對這一方面上(shang)海(hai)恒(heng)遠生物(wu)來為大(da)家細細解讀:
1. 溶血標本及混有紅(hong)細胞的血清采用(yong)ELISA法(fa)檢測易(yi)產生假陽性。可(ke)能是溶血(xue)血(xue)清中含有(you)過(guo)氧化酶物質(紅(hong)細胞或(huo)血(xue)紅(hong)蛋白(bai)中的(de)亞鐵(tie)血(xue)紅(hong)素),在(zai)洗(xi)滌過(guo)程中往往難以完全(quan)洗(xi)脫,它(ta)可(ke)使(shi)H2O2釋(shi)放出(chu)原生態氧(O),從(cong)而(er)催化底(di)物四甲基聯苯胺生(sheng)成可溶性的(de)有(you)色物質,即(ji)顯(xian)藍色,產生(sheng)假(jia)陽(yang)性。所(suo)以嚴重溶血標本禁(jin)用。
2. 標本(ben)受(shou)細(xi)菌污染(ran)。因菌體中可能含有(you)內(nei)源性(xing)辣(la)根過(guo)氧化(hua)物酶,因此,被(bei)細(xi)菌污染(ran)的標本(ben)同溶血標本(ben)一(yi)樣,亦可產生非特異性(xing)顯色而干(gan)擾測定結果。
3. 標本保存(cun)不(bu)當。在冰箱中保存(cun)過久的標本,在間(jian)接法ELISA測定中(zhong)會導致本底(di)過深、造(zao)成(cheng)假陽性;為克服上述(shu)干(gan)擾,ELISA試劑(ji)盒測定的血清(qing)標本(ben)宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內(nei)測定的血清標本可存(cun)放(fang)于4℃,1周后(hou)測定(ding)的血清標本應(ying)低溫(wen)凍存;凍存后(hou)融解(jie)的標本,蛋白質局(ju)部濃(nong)縮,分(fen)布不均,應(ying)充分(fen)混(hun)合(he)后(hou)再測定(ding),但混(hun)勻時應(ying)輕柔(rou),不可強烈振蕩。
“人免疫球蛋白(IgM)ELISA試劑盒”優勢介紹:
1.手續(xu)(xu)簡單(dan):無需單(dan)證,貨物(wu)發到(dao)我司倉庫后,手續(xu)(xu)全部有我們辦理。
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試劑的(de)準備
1. 標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin):標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)的系(xi)列稀釋應在實驗時(shi)準(zhun)(zhun)備,不能儲存。稀釋前將標(biao)準(zhun)(zhun)品(pin)振蕩(dang)混勻。稀釋比(bi)例按下表中進行:
400 pg/ml | (6號標準品(pin)) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul |
200 pg/ml | (5號標準品) | 100ul的原倍標準(zhun)品加入100ul的標準(zhun)品稀(xi)釋液 |
100 pg/ml | (4號(hao)標準品(pin)) | 100ul的5號標準品(pin)加入100ul的標準品稀(xi)釋液 |
50 pg/ml | (3號標準品) | 100ul的(de)4號(hao)標(biao)準品加(jia)入(ru)100ul的標準(zhun)品稀釋液 |
25 pg/ml | (2號標準品) | 100ul的3號標準品加(jia)入100ul的標(biao)準品稀(xi)釋液(ye) |
12.5 pg/ml | (1號標準品(pin)) | 100ul的2號標準品(pin)加(jia)入(ru)100ul的標準品稀釋(shi)液 |
0 pg/ml | (空白對照) | 原倍(bei)濃度(du)不用(yong)稀釋直(zhi)接(jie)加入50ul |
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋(shi)。
ELISA浸泡式(shi)洗滌:
1. 吸(xi)干或甩干孔內(nei)反應液(ye);
2. 用洗滌液過洗一(yi)遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去(qu));
3. 浸泡,即將(jiang)洗(xi)滌液注滿板(ban)孔(kong),放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡(pao)時間不可(ke)隨(sui)意縮短(duan);
4. 吸干孔內液體(ti)(ti)。吸干應徹(che)底,可用水泵(beng)或真空(kong)泵(beng)抽吸,也可甩去(qu)液體(ti)(ti)后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
5. 重復操作c和d,洗滌3-4次(或按(an)說明規定(ding))。在間接(jie)法中如本底較高,可增加洗滌次數(shu)或(huo)延長浸泡(pao)時間。
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更新時間:2023/11/8 9:21:30
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