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試(shi)劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶(ping) |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品(8000 nmol/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包(bao)被板 | 12孔×8條(tiao) | 9 | 標準品稀(xi)釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯(xian)色(se)劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封(feng)板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
ELISA測定中(zhong)(zhong)影響(xiang)因素較多,而且其(qi)操作中(zhong)(zhong)有一(yi)定的技術要求,在臨床檢驗中(zhong)(zhong)除正常反應(ying)外,有時常可見到一(yi)些錯誤結果(即假(jia)陽性(xing)或假(jia)陰(yin)性(xing))如標本(ben)的影響(xiang),對(dui)這一(yi)方面上海(hai)恒(heng)遠生物來為(wei)大家(jia)細細解讀:
1. 溶血(xue)(xue)標(biao)本及(ji)混有紅(hong)細(xi)胞的(de)血(xue)(xue)清采(cai)用(yong)ELISA法檢(jian)測易產生假陽性。可能(neng)是溶血(xue)血(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)含有(you)過(guo)氧化酶物質(zhi)(紅細胞或血(xue)紅蛋白中(zhong)(zhong)的亞鐵(tie)血(xue)紅素(su)),在洗滌過(guo)程中(zhong)(zhong)往往難以完全洗脫,它可使(shi)H2O2釋放出原生態氧(O),從而催化底物四甲基聯苯胺生成(cheng)可溶(rong)性(xing)的有色物質,即顯(xian)藍色,產生假陽(yang)性(xing)。所以嚴重溶(rong)血標本禁用。
2. 標(biao)本受細菌污(wu)染(ran)。因菌體中可能含(han)有內源性(xing)辣根過氧(yang)化物酶,因此,被細菌污(wu)染(ran)的標(biao)本同溶(rong)血標(biao)本一樣,亦可產生非特異性(xing)顯色而干(gan)擾(rao)測定結果(guo)。
3. 標本保存(cun)(cun)不當。在冰箱中保存(cun)(cun)過久(jiu)的標本,在間接法ELISA測定中會導致本底過(guo)深、造成(cheng)假(jia)陽性;為(wei)克服上述干擾,ELISA試劑(ji)盒測(ce)定(ding)的血清標本宜為新鮮采集;如(ru)不(bu)能立即測(ce)定(ding),5 d內測定的血(xue)清標本可存放于(yu)4℃,1周后測定(ding)的血清標(biao)本應低(di)溫(wen)凍存;凍存后融解的標(biao)本,蛋白質局部(bu)濃縮,分(fen)布不均(jun),應充分(fen)混合后再測定(ding),但混勻時應輕柔,不可強烈振(zhen)蕩。
“內毒素倉鼠ELISA試劑盒”優勢介紹:
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試劑的準備
1. 標(biao)準(zhun)品:標(biao)準(zhun)品的系列稀釋應在實驗時準(zhun)備(bei),不(bu)能儲存。稀釋前將(jiang)標(biao)準(zhun)品振蕩(dang)混勻(yun)。稀釋比例按下表中進行:
400 pg/ml | (6號標準品) | 原倍(bei)濃度不用稀釋(shi)直接加入(ru)50ul |
200 pg/ml | (5號標準(zhun)品) | 100ul的(de)原倍(bei)標(biao)準品(pin)加入(ru)100ul的標準品稀釋液 |
100 pg/ml | (4號(hao)標準品) | 100ul的5號標準品加入100ul的標(biao)準品稀釋液 |
50 pg/ml | (3號標準品) | 100ul的4號標準(zhun)品加入100ul的標(biao)準品稀釋液 |
25 pg/ml | (2號標準品) | 100ul的(de)3號標準品加入100ul的(de)標準品稀釋液(ye) |
12.5 pg/ml | (1號標(biao)準品) | 100ul的2號(hao)標準品加入100ul的標準(zhun)品(pin)稀釋液(ye) |
0 pg/ml | (空白(bai)對照) | 原(yuan)倍濃度不用稀釋(shi)直(zhi)接加入50ul |
2. 洗滌緩沖液(ye)(50×)的稀(xi)釋:蒸餾水50倍稀釋。
ELISA浸泡式洗滌:
1. 吸干(gan)或甩干(gan)孔內反應液;
2. 用洗滌(di)液過洗一(yi)遍(bian)(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
3. 浸泡,即將洗(xi)滌液注滿(man)板(ban)孔,放置(zhi)1-2分(fen)鐘,間(jian)歇搖動,浸(jin)泡時間(jian)不可隨意縮短;
4. 吸(xi)(xi)干孔(kong)內(nei)液體(ti)(ti)。吸(xi)(xi)干應徹底,可用(yong)水(shui)泵或真(zhen)空泵抽吸(xi)(xi),也可甩去(qu)液體(ti)(ti)后(hou)在清潔毛巾或吸(xi)(xi)水(shui)紙上拍干;
5. 重(zhong)復操作c和d,洗滌3-4次(或按(an)說明規定(ding))。在間接法中(zhong)如本(ben)底較高,可增加洗滌(di)次數或延長浸泡時(shi)間。
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更(geng)新時間:2023/12/19 9:05:21
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