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人非酰基化Ghrelin（UAG）elisa試劑盒多少錢

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價格： 4900

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采購度：144 原產地：中國大陸

發布時間：2017/10/31 16:34:03

產品簡(jian)介：人非(fei)酰基(ji)化Ghrelin（UAG）elisa試(shi)劑(ji)盒多少(shao)錢用于體外定量(liang)檢測(ce)血(xue)清、血(xue)漿(jiang)、組織、細胞上清及(ji)相關液體樣本中人非(fei)酰基(ji)化Ghrelin（UAG）的含(han)量(liang)。

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標簽(qian)：UAG說明書 人非酰基化 elisa試劑盒原理

詳細信息

人(ren)非酰基(ji)化Ghrelin（UAG）多(duo)少錢
本試(shi)劑盒用于(yu)體(ti)外(wai)定量(liang)檢測(ce)血清、血漿(jiang)、組織、細胞上(shang)清及相關液體(ti)樣本中人非酰基(ji)化Ghrelin（UAG）的含(han)量(liang)。
有效(xiao)期(qi)：6個月(yue)
保存條(tiao)件(jian)：2-8℃
本試(shi)劑盒僅(jin)供體外研究使用，不用于臨床診斷

實驗(yan)原理
試劑盒采用(yong)(yong)(yong)雙抗(kang)(kang)體(ti)一步夾心法酶(mei)聯(lian)免疫吸(xi)附(fu)試驗（ELISA）。往預先包被人(ren)非酰(xian)基化(hua)Ghrelin（UAG）捕獲抗(kang)(kang)體(ti)的(de)包被微孔中，依次加入標(biao)(biao)(biao)本、標(biao)(biao)(biao)準(zhun)品(pin)、HRP標(biao)(biao)(biao)記的(de)檢測抗(kang)(kang)體(ti)，經過溫(wen)育(yu)并(bing)徹底(di)洗滌。用(yong)(yong)(yong)底(di)物TMB顯色，TMB在(zai)過氧化(hua)物酶(mei)的(de)催化(hua)下轉化(hua)成(cheng)藍(lan)色，并(bing)在(zai)酸(suan)的(de)作(zuo)用(yong)(yong)(yong)下轉化(hua)成(cheng)*終的(de)黃(huang)色。顏色的(de)深淺和樣品(pin)中的(de)人(ren)非酰(xian)基化(hua)Ghrelin（UAG）呈正(zheng)相(xiang)關。用(yong)(yong)(yong)酶(mei)標(biao)(biao)(biao)儀在(zai)450nm 波長(chang)下測定吸(xi)光(guang)度(du)（OD 值），計算(suan)樣品(pin)濃(nong)度(du)。

樣本(ben)處(chu)理(li)及(ji)要求
1. 血清：全血標本請于(yu)室溫放置2小時或4℃過夜后于(yu)1000g離心20分鐘，取上清即可檢(jian)測，或將標本放于(yu)-20℃或-80℃保存(cun)，但應避免反復凍融。
2. 血(xue)漿：可用(yong)EDTA或(huo)肝素作為抗凝劑，標本采(cai)集(ji)后30分(fen)鐘內于(yu)2 - 8°C 1000g離心(xin)20分(fen)鐘，或(huo)將標本放于(yu)-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應避免反復(fu)凍融。
3. 組(zu)(zu)織(zhi)勻漿：用(yong)預冷的(de)(de)PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組(zu)(zu)織(zhi)，去除殘留血液(ye)（勻漿中裂(lie)解的(de)(de)紅細(xi)胞會影響測量結(jie)果(guo)），稱(cheng)重后將組(zu)(zu)織(zhi)剪碎。將剪碎的(de)(de)組(zu)(zu)織(zhi)與對應(ying)體積的(de)(de)PBS（一般(ban)按1:9的(de)(de)重量體積比，比如1g的(de)(de)組(zu)(zu)織(zhi)樣(yang)品對應(ying)9mL的(de)(de)PBS，具體體積可(ke)根據實(shi)驗需要適當調(diao)整，并做好記錄(lu)。推薦(jian)在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃(li)勻漿器中，于冰(bing)上充分研磨。為了進一步裂(lie)解組(zu)(zu)織(zhi)細(xi)胞，可(ke)以對勻漿液(ye)進行(xing)超聲破碎，或反復凍融。*后將勻漿液(ye)于5000×g離心5~10分鐘，取上清(qing)檢測。
4. 細胞(bao)培養(yang)物(wu)上清或其它生物(wu)標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于(yu)-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注(zhu)：標(biao)(biao)本(ben)溶(rong)血會影響*后檢(jian)測結果(guo)，因(yin)此(ci)(ci)溶(rong)血標(biao)(biao)本(ben)不宜進行此(ci)(ci)項檢(jian)測。

標本處理
1. 本(ben)公(gong)司只對試劑盒本(ben)身負責(ze)，不(bu)對因使(shi)(shi)用(yong)該試劑盒所造成的樣(yang)(yang)本(ben)消(xiao)耗負責(ze)，請(qing)使(shi)(shi)用(yong)者使(shi)(shi)用(yong)前充(chong)分(fen)考慮到樣(yang)(yang)本(ben)的可能(neng)使(shi)(shi)用(yong)量，預留充(chong)足的樣(yang)(yang)本(ben)。
2. 實驗前應預測標(biao)本含量，如果標(biao)本濃度過高，應對標(biao)本進行稀(xi)(xi)釋，使稀(xi)(xi)釋后的(de)標(biao)本符合試劑盒(he)的(de)檢(jian)測范圍，計算時再乘以(yi)相(xiang)應的(de)稀(xi)(xi)釋倍數。標(biao)本使用0.01mol/L的(de)PBS稀(xi)(xi)釋(PH=7.0-7.2)。
3. 若所(suo)檢(jian)樣(yang)本(ben)不包含(han)在(zai)說明書所(suo)列樣(yang)本(ben)之中，建議進行預實驗(yan)驗(yan)證其有效(xiao)性(xing)，并注意留存(cun)樣(yang)本(ben)。
4. 使用化學(xue)裂解液(ye)制(zhi)備的組(zu)織(zhi)勻漿或細胞提取(qu)液(ye)可能會由于(yu)某些化學(xue)物質(zhi)的引入導致ELISA實(shi)驗結果偏差。
5. 若樣本為細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)，因該(gai)類(lei)樣本干擾因素較(jiao)多(duo)，如：細(xi)胞(bao)狀態(tai)、細(xi)胞(bao)數量(liang)、采(cai)樣時間等，所以可(ke)能存在(zai)檢測不出的情況。
6. 某些天(tian)然蛋白(bai)或重組蛋白(bai)，包括原核(he)及真核(he)重組蛋白(bai)，可能因為與本產品所使用的檢(jian)測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢(jian)測出。
7. 建議(yi)使用(yong)新鮮樣本，保存時間(jian)過長可(ke)能會存在蛋白降解或變性導致實(shi)驗結(jie)果偏(pian)差。

需要而未(wei)提供的試劑和器材(cai)
1.酶標儀(yi)（450nm）
2.高精度加樣(yang)器及槍(qiang)頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
4.蒸餾水(shui)或去離子水(shui)

自封袋1個1個無
備(bei)注：
1. 標準(zhun)品(pin)濃(nong)度依次為：1200、600、300、150、75、0 pg/mL
2. 經過大量(liang)正(zheng)常標(biao)本(ben)檢(jian)驗(yan)，標(biao)本(ben)的(de)正(zheng)常濃度(du)值(zhi)均在試劑(ji)盒提供的(de)檢(jian)測范(fan)圍內，實驗(yan)過程中直接取50μL樣(yang)(yang)本(ben)上樣(yang)(yang)即可。當(dang)有部分(fen)樣(yang)(yang)本(ben)值(zhi)超過標(biao)準(zhun)品濃度(du)時，可用樣(yang)(yang)本(ben)稀(xi)釋液將標(biao)本(ben)進行適當(dang)稀(xi)釋后再進行實驗(yan)。
注意事項
1.嚴格按照規定的時間和(he)溫(wen)度(du)進行溫(wen)育以保證(zheng)準確(que)結果。所有試劑(ji)都(dou)必須在使用(yong)前達到(dao)室溫(wen)20-25℃。使用(yong)后立即冷藏保存(cun)試劑(ji)。
2.洗板不(bu)正確(que)可以導致(zhi)不(bu)準(zhun)確(que)的結(jie)果(guo)。在(zai)加入底物前(qian)確(que)保(bao)盡量吸干孔內液體。溫育過程中(zhong)不(bu)要(yao)讓微(wei)孔干燥掉。
3.消除板底(di)殘留(liu)的液(ye)體和手指印(yin)，否則影響(xiang)OD值(zhi)。
4.底(di)(di)物顯(xian)色液(ye)應呈無色或很淺的顏(yan)色，已(yi)經變藍的底(di)(di)物液(ye)不能使用。
5.避免試劑和(he)標本的(de)交叉污染(ran)以免造成錯誤結果。
6.在儲存和(he)溫育時(shi)避(bi)免強光(guang)直接(jie)照射(she)。
7.平衡至室溫后再打(da)開(kai)密封袋以防水滴凝(ning)聚在冷(leng)板條上(shang)。
8.任何反(fan)應試(shi)劑(ji)不能(neng)接觸漂白溶(rong)劑(ji)或(huo)漂白溶(rong)劑(ji)所散發的(de)強烈氣體(ti)。任何漂白成分(fen)都會破壞(huai)試(shi)劑(ji)盒中反(fan)應試(shi)劑(ji)的(de)生(sheng)物活性。
9.不能使用(yong)過期(qi)產品(pin)。
10.如果可能傳播(bo)疾病，所有的(de)樣品(pin)都應管理好，按照規(gui)定(ding)的(de)程序處理樣品(pin)和檢測裝置。

試劑(ji)準(zhun)備
試劑盒從冷藏環境中取出(chu)應在室溫平(ping)衡后方可使用(yong)。
20×洗(xi)滌緩沖液的稀釋：蒸(zheng)餾水(shui)按(an)1：20稀釋，即(ji)1份(fen)20×洗(xi)滌緩沖液加19份(fen)蒸(zheng)餾水(shui)。

操作流程
1. 從室溫平衡(heng)20min后的鋁箔袋(dai)中取出所需板條，剩余板條用自封袋(dai)密封放回4℃。
2. 設置標準品(pin)孔和樣本孔，標準品(pin)孔各加不同濃度的(de)標準品(pin)50μL；
3. 樣本(ben)孔中(zhong)加(jia)(jia)入待(dai)測樣本(ben)50μL；空白孔不加(jia)(jia)。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣(yang)本孔中每孔加入辣根過氧化(hua)物(wu)酶(mei)（HRP）標記的檢測(ce)抗體100μL，用封(feng)板膜封(feng)住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫(wen)(wen)箱溫(wen)(wen)育(yu)60min。
5. 棄去(qu)(qu)液(ye)體(ti)，吸水紙上(shang)拍干(gan)，每孔加滿洗(xi)滌液(ye)（350μL），靜置1min，甩去(qu)(qu)洗(xi)滌液(ye)，吸水紙上(shang)拍干(gan)，如此重復(fu)洗(xi)板(ban)(ban)5次（也可(ke)用(yong)洗(xi)板(ban)(ban)機洗(xi)板(ban)(ban)）。
6. 每孔加入底物A、B各(ge)50μL，37℃避光(guang)孵育15min。
7. 每孔(kong)加入終止液(ye)50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔(kong)的(de)OD值。

實驗結(jie)果計(ji)算
以所測標(biao)準(zhun)品(pin)(pin)(pin)的(de)OD值為橫坐標(biao)，標(biao)準(zhun)品(pin)(pin)(pin)的(de)濃度值為縱坐標(biao)，在坐標(biao)紙上(shang)或用(yong)相關軟件繪制(zhi)標(biao)準(zhun)曲線(xian)，并得到直線(xian)回歸方程，將(jiang)樣品(pin)(pin)(pin)的(de)OD值代(dai)入(ru)方程，計(ji)算出樣品(pin)(pin)(pin)的(de)濃度。
性能特點
1. 檢測范圍：37.5 pg/mL – 1200 pg/mL。
2. 靈敏度：檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性：不與其(qi)它可溶性結構類似物交叉(cha)反應。
4. 重復性：板(ban)內變(bian)異系數(shu)小于(yu)10% ，板(ban)間(jian)變(bian)異系數(shu)小于(yu)15% 。

說明
1. 由(you)于現有條(tiao)件及科學技(ji)術水平尚不(bu)能對所有供(gong)貨商提供(gong)的(de)所有原料進(jin)行全面(mian)的(de)鑒定與(yu)分析，本產(chan)品可能存(cun)在一定的(de)質量技(ji)術風險。
2. *終(zhong)的(de)實驗(yan)結果與試劑的(de)有效性、實驗(yan)者的(de)相(xiang)關操(cao)作以及當(dang)時的(de)實驗(yan)環境密(mi)切(qie)相(xiang)關，請務必準備充(chong)足的(de)標本備份。
3. 不同(tong)批次的同(tong)一產(chan)品可(ke)能會有少許差別，如：檢測限、靈敏(min)度以及顯色(se)時間等，請(qing)依(yi)據試劑盒(he)內說(shuo)明書(shu)進行實驗操作(zuo)，網站電子版(ban)說(shuo)明書(shu)僅(jin)作(zuo)參考。
4. 只(zhi)(zhi)有全部使用(yong)本試劑盒(he)配套試劑才(cai)能保證檢測(ce)效果，不能混用(yong)其他制造商的(de)產品(pin)。只(zhi)(zhi)有嚴格遵守(shou)本試劑盒(he)的(de)實驗(yan)說明才(cai)會得(de)到*佳的(de)檢測(ce)結果。

常見問題
若實驗效果(guo)不好，請(qing)及(ji)(ji)時(shi)對顯色結(jie)果(guo)拍照(zhao)，保留所用(yong)板條(tiao)及(ji)(ji)未使用(yong)試劑，并妥(tuo)善保存，然后聯系我(wo)公(gong)司技(ji)術(shu)支持為您解決問題。同(tong)時(shi)您也可以參考以下資料：
問題可能原因(yin)解決方(fang)案(an)
標準曲線差吸取及洗滌不充(chong)分充(chong)分的吸取及洗滌
移液不精(jing)確檢(jian)查(cha)和校(xiao)正移液器(qi)
精密度低洗滌不充分(fen)按說(shuo)明書要求充分(fen)洗滌和浸泡
混(hun)勻不(bu)充(chong)分(fen)和吸取(qu)試(shi)劑不(bu)足(zu)充(chong)分(fen)混(hun)勻和吸取(qu)試(shi)劑
重復利(li)用(yong)吸頭(tou)、容器(qi)(qi)和覆膜使用(yong)加樣器(qi)(qi)要(yao)更換新的吸頭(tou)、使用(yong)新的容器(qi)(qi)和覆膜
加樣不精確(que)檢查和校正移液(ye)器
O.D值低(di)每孔加(jia)(jia)的試劑量(liang)不(bu)精(jing)確(que)校正移液器，精(jing)確(que)加(jia)(jia)入試劑
溫育時間不正確(que)保證(zheng)充足的(de)溫育時間
溫(wen)育溫(wen)度不正(zheng)確試劑(ji)要平衡至室溫(wen)并保證(zheng)準確的溫(wen)育溫(wen)度
酶標記物(wu)或底物(wu)失效通過混合(he)酶標記物(wu)和底物(wu)，顏色應迅(xun)速(su)顯現來(lai)檢查
沒有(you)加入終(zhong)止(zhi)液(ye)按照(zhao)說明書(shu)實驗(yan)操(cao)作步(bu)驟加入終(zhong)止(zhi)液(ye)
超出讀(du)(du)(du)數時間讀(du)(du)(du)數在說明書推(tui)薦(jian)的(de)讀(du)(du)(du)數時間內(nei)讀(du)(du)(du)數
樣(yang)本(ben)(ben)(ben)值不(bu)正確(que)的樣(yang)本(ben)(ben)(ben)儲存方式正確(que)儲存樣(yang)本(ben)(ben)(ben)，使用新鮮樣(yang)本(ben)(ben)(ben)進行(xing)實(shi)驗(yan)
不正確的樣本收集(ji)和處(chu)理方(fang)法采(cai)取正確的樣本收集(ji)和處(chu)理方(fang)法
待測物質(zhi)在樣(yang)(yang)本(ben)中含量低(di)使用新(xin)鮮樣(yang)(yang)本(ben)，重復實驗

更新時間：2023/12/8 9:01:43

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